超聲波粉碎儀在鏈霉菌超聲破碎時的方法條件

　　超聲波粉碎儀可儲存5個控制模式。且有定時數(shù)字顯示，輸出能量由光條顯示，0～100%連續(xù)可調(diào)，操作直觀方便。超聲波粉碎儀工作方式有間斷和連續(xù)兩種選擇，間斷工作時，脈沖寬度和間斷時間可分別設(shè)定。超聲波粉碎儀的工作時間可由數(shù)字定時器控制，達(dá)到預(yù)定時間自動轉(zhuǎn)變?yōu)榇龣C(jī)狀態(tài)，定時范圍1min～99min。超聲波粉碎儀可人為自由控制工作和截止時間，使用靈活方便，適用于少量樣品的處理工作。
　　那么超聲波粉碎儀在鏈霉菌超聲破碎的，使用的方法條件是什么呢？
　　前處理一般就是配置成一定濃度的菌懸液。使用超聲波粉碎儀進(jìn)行超聲破碎時采用的具體條件是：
　　1、取細(xì)菌的24 h培養(yǎng)液于5 000 r／min下離心5 min收集菌體；
　　2、用pH 7．5的Na2HPO-NaH2PO緩沖液洗滌3次，再用該緩沖液將菌體配成1：3的菌懸液．置于40 mL大塑料試管內(nèi)；
　　3、將大塑料試管置于冰浴中，采用超聲波破碎(功率200 W，1／2”探頭，破碎30 s，間歇30 S)；
　　4、破碎液于12 000 r／min下高速冷凍離心30 min，收集細(xì)胞碎片和上清液，超聲破菌流程與上述基本一致，就是洗滌菌體也可以用預(yù)冷的生理鹽水或pH8的Tris－HCl，洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加終濃度1 mM的PMSF。為確定合適的超聲強(qiáng)度和次數(shù)，有必要隨時鏡檢觀察菌體是否*破碎。放線菌屬于原核生物系統(tǒng)進(jìn)化樹上的（G＋C）摩爾百分含量（mol％）高的革蘭氏陽性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時，采用的是400W超聲波粉碎儀，超5停5的方法，效果不錯，但是用在鏈霉菌上，似乎沒什么效果，因為大腸桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。